Тонкослойная хроматография и ее роль в контроле качества пищевых продуктов
Пластинки проявляют указанными выше проявителями. Причем в случае применения хлористого палладия пятна фозалона окрашиваются в желтый цвет на белом фоне, а примеси —.в коричневый. Окраска не исчезает в течение длительного промежутка времени. При применении второго проявителя пятна фозалона окрашиваются в синий цвет на желтом фоне, а примеси совсем не окрашиваются. Следует отметить, что в этом случае пятна фозалона через 10—15 мин. бледнеют. Rf фозалона равно 0,5 (рис. 5).
Чувствительность метода 0,1 мг/кг.
Этот вариант метода позволяет качественно определять содержание фозалона в растительной пробе.
Для количественного определения фозалона в пробе мы использовали двухмерную хроматографию на пластинках размером 15 ´ 20 см.
Экстракцию и отгонку проводят так же, как и в предыдущем случае. Экстракт без очистки наносят на пластинку полоской длиной 5 см и шириной 1 см на расстоянии 1,5 см от нижнего края (нижняя сторона пластинки 15 см) и 2 см от левого края пластинки.
Хроматографирование проводят в подвижном растворителе гексан — ацетон (4 : 1). Дают растворителю продвинуться на 12—15 см, потом пластинку высушивают на воздухе в течение 20 мин. Далее поворачивают ее на 90е так, чтобы левый край пластинки служил основанием. С левой стороны пластинки наносят стандарты с разным содержанием фозалона и хроматографируют в том же подвижном растворителе. С целью получения хорошо сформированных пятен проводят повторное хроматографирование в том же направлении, но с применением другого подвижного растворителя — хлороформа.
После проявления пластинок теми же реактивами, что и в предыдущем случае, получали пятна с Rf = 0,82 (рис. 6). Количественное определение фозалона проводят сравнением пятна анализируемой пробы с пятнами стандартов.
Предложенным методом было проведено определение остатков фозалона в яблоках (см. таблицу).
Определение фозалона в 100 г яблок
|
Внесено фозалона, мкг |
Найдено фозалона, мкг |
Ошибка |
Внесено фозалона, мкг |
Найдено фозалона, мкг |
Ошибка | ||
|
мкг |
% |
мкг |
% | ||||
|
25 |
20 |
5 |
- 20 |
75 |
70 |
5 |
- 6,7 |
|
50 |
45 |
5 |
-10 |
100 |
85 |
15 |
- 15 |
|
50 |
40 |
10 |
- 20 | ||||
Глава 3. ТСХ – оборудование
3.1 Оборудование фирмы НТЦ ЛЕНХРОМ для инструментальной ТСХ
Оборудование фирмы НТЦ ЛЕНХРОМ позволяет провести все рабочие этапы современной тонкослойной хроматографии:
§ дозировка и нанесение проб
§ проведение процесса хроматографии
§ УФ-обнаружение
§ детектирование (окрашивание) хроматограмм
§ видеозапись изображений пластинок
§ количественная обработка хроматограмм
Объекты исследования и области применения планарной хроматографии
1. Готовые лекарственные формы
§ подлинность действующих веществ
§ точность дозировки
§ наличие вредных примесей и добавок
2. Фармакология
§ фармакокинетические исследования
§ изучение метаболизма действующих веществ
3. Биохимия и медицина
§ определение содержания важнейших биологически активных соединений в жидкостях и тканях организма
§ изменение содержания этих веществ при патологии
§ судмедэкспертиза
§ допинг-контроль
4. Охрана окружающей среды
§ анализ пестицидов в питьевой и сточных водах, осадках, продуктах питания
§ анализ токсических веществ (например, афлатоксинов) в продуктах питания
3.1.1 Портативный набор для тсх
Портативный набор для ТСХКомплект предназначен для качественного и полуколичественного анализов многокомпонентных смесей органических и неорганических веществ и может найти применение во всех областях науки и техники, где для анализа используется метод тонкослойной хроматографии.Комплект позволяет:
§ проводить анализ смесей методом ТСХ, основанном на разделении анализируемых веществ за счет различной скорости перемещения их по тонкому слою сорбента, нанесенного на плоскую подложку (стеклянную, полимерную или алюминиевую);
§ наносить точное количество анализируемых веществ на хроматографические пластины;
§ анализировать одновременно большое количество проб;
§ обнаруживать и просматривать хроматограммы в ультрафиолетовом свете;
§ окрашивать хроматограммы;
§ удалять органические растворители с хроматограмм высушивающим устройством с подогревом.
Комплект включает:
§ Ультрафиолетовый осветитель УФО-254
§ Хроматографическую камеру для пластин размером 130-130-56 см
§ Пластины для ТСХ (10х10), одна упаковка - 50 шт
§ Пульверизатор для вязких и агрессивных жидкостей
§ Пульверизатор для маловязких и неагрессивных жидкостей
§ Фен
Торрированные стеклянные капилляры V=1 ml
3.1.2 Базовый набор для ТСХ
Базовый набор для ТСХ (расширенный)
§ УФ-кабинет 254/365 (ультрафиолетовая лампа) - 1 шт.
§ Спрей-камера коррозионностойкая (камера для окрашивания хроматограмм методом опрыскивания) - 1 шт.
§ Столик с подогревом для нанесения образцов на пластины - 1 шт.
§ Камера хроматографическая (для пластин 15x15 см) - 2 шт.
§ Камера хроматографическая (для пластин 10x10 см) - 2 шт.
§ Сушильный шкаф ШСУ - 1 шт.
§ Пульверизатор для агрессивных жидкостей - 1 шт.
§ Пульверизатор для маловязких жидкостей с резиновой "грушей"- 1 шт.
§ Микрошприц V=1 мкл - 1 шт.
§ Микрошприц V=10 мкл - 1 шт.
§ Стеклянные капилляры V=1 мкл -100 шт.
§ Микрокап (держатель капилляров) - 1 шт.
§ Пластины на стеклянной подложке АТСХ (10x10 см) - 20 шт.
§ Пластины "Сорбфил" ПТСХ-П-А 10x10 см - 50 шт.
§ Пластины "Сорбфил" ПТСХ-П-А-УФ 10x10 см - 50 шт.
