Элементарные тельца хламидий красные на сине-зе­леном фоне. Инициальные тельца в одних случаях окра­шиваются в красный, в других - в зеленоватый цвет. Метод рекомендуется для исследования патологическом материала, в частности плаценты.

Окраска по Маккиавелло. Готовят три раствора: раствор А - 250 мг фуксина основного растворяют в 100 мл бидистиллированной воды (хранится 10 дней при температуре 4°С); раствор В - 10 г лимонной кислоты растворяют в 100 мл бидистиллированной воды; рас­твор С - 1 г метиленовой сини растворяют в 100 мл би­дистиллированной воды.

Техника окраски: мазки фиксируют над пламенем; раствор А фильтруют через фильтровальную бумагу и наносят на мазок, покрытый фильтровальной бумагой, на 5—10 мин; промывают дистиллированной водой; диффе­ренцируют в растворе В, состоящем из 5 мл раствора В и 100 мл бидистиллированной воды, в течение 20—30 с; промывают водопроводной водой; докрашивают раство­ром С в течение 30 с; промывают водой, высушивают на воздухе. Хламидий окрашиваются в ярко-красный цвет, клет­ки патологического материала — в светло-синий, ядра клеток — в темно-синий цвет.

Приложение 2

Окраска акридиновым оранжевым для люминесцентной микроскопии. Готовят жидкость Корнуа - шесть объемов 96-100%-ного этилового спирта, три объема хлороформа, один объем ледяной уксусной кислоты. Фосфатно-цитратный буфер (рН 3,8): лимонная кисло­та - 10 г, Nа2НРО4-7Н2О - 15 г, дистиллированная во­да - 1 л. При наличии Nа2НРО4- 12Н2О проводят пере­расчет:

Nа2НРО4´7Н2О НЬ 268,157

Nа2НР04´12Н20 НЬ 358,157

15 г - 268,157 Х = 15 ´ 358,157/268,157 = 20,034

х - 358,157

Маточный раствор акридинового оранжевого: акри­диновый оранжевый — 0,1 г, фосфатно-цитратный бу­фер — 100 мл (может храниться в холодильнике). Рабо­чий раствор акридинового оранжевого готовят в кон­центрации 1: 10 тыс. — 1: 30 тыс. на основе указанного буфера.

Рис. 1

Рис. 2

Рис. 3

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Равилов Р.Х. Хламидиоз собак и кошек. – М.: ООО «Аквариум-Принт», 2006. – 128с.
2. Обухов И.Л. Хламидиоз кошек – Мытищинская межрайонная типография Упрполиграфиздат, 1994. – 91 с.
3. И.В. Фомченко, А.П. Медведев, А.Н. Притыченко, А.Э. Высоцкий, А.А. Вербицкий - Витебск: УО “ВГАВМ”, 2004. – 23 с.