Маслянокислые бактерии как продуценты кислот
При втором подходе путем подбора первоначально изолированных и тщательно изученных компонентов создается система с известным составом. Получаемые при этом культуры часто называют гнотобиотическими (этот термин обсуждается в работе Догерти (Dougherty, 1959)), поскольку здесь точно известен состав и даже то, присутствуют или отсутствуют бактерии. Гнотобиотические культуры прежде использовали главным образом для изучения питания, биохимии и других аспектов жизни отдельных видов и штаммов или для изучения взаимодействия двух видов. Однако в последнее время экологи начали экспериментировать с более сложными полиаксеническими культурами в поисках путей построения автономных экосистем (Nixon, 1969; Taub, 1969, 1974).
Эти два противоположных подхода к созданию лабораторных микроэкосистем параллельны двум давно существующим подходам (холистическому и мерологическому) экологов к изучению озер и других больших систем, существующих в природе.
Существует широко распространенное заблуждение относительно «равновесия» в аквариуме с рыбами. Вполне возможно достигнуть некоторого приблизительного равновесия газового и пищевого режима при условии, что в нем мало рыб, а воды и растений много. Еще в 1851 г. Дж. Уорингтон «установил это удивительное и восхитительное равновесие между животным и растительным царствами» в аквариуме объемом 12 галлонов (54,6 л), поселив в нем несколько золотых рыбок, улиток и большое количество валлиснерии (водное растение), а с ними и множество разнообразных микроорганизмов. Уорингтон правильно оценил не только взаимодействие рыб и растений, но и отметил значение детритоядных улиток «в разложении остатков растений и водорослевой слизи», в результате чего «то, что иначе могло бы действовать как ядовитое начало, превращается в плодородную среду для роста растений». Большинство попыток любителей добиваться равновесия в аквариуме терпит неудачу из-за того, что для наличного количества ресурсов в аквариум помещают слишком много рыб (диагноз: элементарный случай перенаселения). Для полного самообеспечения одной рыбе среднего размера требуется много кубических метров воды и организмов, служащих пищей. Поскольку аквариум обычно держат дома, на работе или в школе ради «наблюдения за рыбами», помещая большое число рыб в малом пространстве, необходимо дополнительное питание, аэрация и периодическая очистка аквариума (Одум, 1986).
В данной работе была проведена постановка двух модельных микроэкосистем. В одной системе исследовалось влияние микрофлоры реки Кривая Болда на микробиологический состав садовой почвы. Во второй микроэкосистеме наблюдалось влияние микрофлоры озера Баскунчак на микробиологический состав садовой почвы.
Для постановки модельных микроэкосистем на дно двух высоких цилиндров V = 500 см3 помещалось 100 г. исследуемой почвы и заливалось 1000мл. воды в первом случае взятой из реки Кривая Болда, а во втором – из озера Баскунчак. В том виде экосистемы оставляли на открытом воздухе на 3 недели. По прошествии этого времени со дна цилиндра забирают небольшое количество почвы, просушивают ее на воздухе, затем взвешивают в количестве 1г, которую помещали в пробирку с 10 г. стерильной воды. Производили ряд последовательных разведений:10-1 -10-7. Из каждого разведения брали по 1 мл и помещали в высокие стерильные пробирки методом глубинного посева. В полученную культуральную жидкость заливают жидкую среду Виноградского до 3/4 объема.
Данные экосистемы исследовались также на среде Имшенецкого, при этом среда в высокой пробирке, предварительно простерилизованная засевается комочком почвы и помещается в термостат.
Необходимость изучения маслянокислых бактерий в водоемах была очевидной. Обследование разнотипных водоемов с широким спектром гидролого-гидрохимических и продукционных характеристик позволило впервые выявить экологические особенности распределения отдельных видов маслянокислых бактерий. Главными факторами, обуславливающими преимущественное развитие тех или иных бактерий в отложениях, являются концентрация, состав и доступность Сорг - соединений, отражающие трофический статус водоемов.C pasteurianum, сбраживающий простые сахара, доминирует вилах евтрофных озер донных отложений полисапробных зон с максимальным содержанием легкогидролизуемых соединений. C. butyricum и C. felsineum, ферментирующие различные полисахариды, преобладают в мезотрофных озерах и водохранилищах
, грунты которых формируются под влиянием аллохтонного стока и прибрежной растительности. C. acetobutyricum, обладающий способностью усваивать не только углеводы и аминокислоты, но также лигнино – гумусовые соединения, достигает максимума донных отложениях ацидных хтониоевтрофных озер. Таким образом, полученные на обширном материале новые для водной микробиологии сведения неоспоримо свидетельствуют о геохимической значимости маслянокислых бактерий, которые являются важнейшим звеном бактериальных сообществ донных отложений внутренних водоемов разного типа (Дзюбан, 2005).
Глава 3. Результаты исследований
При постановке накопительной культуры, выделении и микроскопировании маслянокислых бактерий получили следующие данные.
Таблица 1
Культуральные признаки маслянокислых бактерий на среде Виноградского
Степень разведения |
Культуральные признаки |
Морфологические признаки | |
Обнаруженные микроорганизмы |
10-1 |
Образовался серый осадок, имеется муть и пленка. | |
Г+ удлиненные и утолщенные палочки, наблюдаются клостридиальные споры |
Clostridium |
10-2 | |
Образовался серый осадок, появилась муть. |
Г + удлиненные палочки с закругленными концами, образующие плектридиально расположенные споры |
Clostridium | |
10-3 |
Образовался осадок, имеется муть |
Г + удлиненные палочки с закругленными концами, образующие плектридиально расположенные споры |
Clostridium |
10-4 |
Имеется осадок, имеется муть и газ |
Г+ цилиндрические палочки с клостридиальными спорами | |
Clostridium |
10-5 |
Образование осадка, мути и газа | |
Г+ палочки с закругленными концами со спорой на конце |
Clostridium |
10-6 | |
Образование осадка, мути и газа |
Г+ длинные и толстые палочки с клостридиальными спорами |
Clostridium | |
10-7 |
Имеется осадок, имеется муть |
Г + удлиненные палочки с круглыми концами с плектридиальными спорами |
Clostridium |
10-1 |
Имеется осадок, образовалась муть | ||
Г + удлиненные палочки с закругленными концами, образующие плектридиально расположенные споры |
Clostridium |
10-2 | |
Образовался газ, осадок серый, имеется муть |
Г+ цилиндрические палочки с клостридиально расположенными спорами |
Clostridium | |
10-3 |
Образовался серый осадок, среда мутная, имеется газ |
Г+ палочки с закругленными концами и со спорой на конце |
Clostridium |
10-4 |
Образовался серый осадок, образовался газ, имеется муть |
Г+ удлиненные и утолщенные палочки, наблюдаются споры | |
Clostridium |
10-5 |
Образовался осадок, имеется запах газа, муть | |
Г+ палочки с клостридиально расположенными спорами |
Clostridium |
10-6 | |
Образовался серый осадок, имеется муть, образовался газ |
Г+ длинные и утолщенные палочки, наблюдаются споры |
Clostridium | |
10-7 |
Образовался серый осадок и газ, имеется муть |
Clostridium |