Галофильные микроорганизмы озера Мраморное
После просмотра культур проводился диагностический тест для определения принадлежности выделенных микроорганизмов к семейству Enterobacteriaceae. Идентификация микроорганизмов осуществлялась при помощи пластины биохимической, дифференцирующей энтеробактерии «ПБДЭ». Исследование проводилось в соответствии с инструкцией по применению «ПБДЭ» (приложение 1) .
Глава 3. Результаты исследования
На начальном этапе исследования производился посев разведений воды из оз. Мраморное и микроэкосистемы оз. Мраморное для выявления галофильных микроорганизмов различных трофических групп.
Спустя 7 дней инкубации в термостате при температуре 30°С был произведен просмотр колоний, выросших на данных чашках Петри. Было определено общее число колоний микроорганизмов в 1 мл воды, а также определена родовая принадлежность выросших колоний микроорганизмов.
1. Результаты исследования воды из оз. Мраморное.
Посев производился на 4 различные среды для выделения разных групп микроорганизмов:
1) Соленный МПА использовался для выявления галофильных гетеротрофов, обитающих в данных экстремальных условиях.
Общее число гетеротрофных микроорганизмов определялся посевом разведений 10-1 и 10-2 на твердую питательную среду- МПА глубинным способом.
В результате этого посева было определено ОМЧ:
ОМЧ=1,9*104 КОЕ/мл.
На МПА, приготовленном на основе воды из оз. Мраморное, были обнаружены колонии с различными культуральными признаками. Была проведена микроскопия фиксированных и окрашенных по Грамму микроорганизмов из этих колоний и определен родовой состав микроорганизмов, образующих данные колонии (табл.2).
Таблица 2
Культуральные и морфологические признаки гетеротрофных микроорганизмов
|
№ |
Культуральные признаки |
Число колоний |
Морфологические признаки |
Предположительный род |
|
1 |
Колонии круглой формы, с гладкими краями, блестящей поверхностью, слизистой консистенции, светло-коричневого цвета |
106 |
Г- длинные бесспоровые палочки, 1,0-3,0*2,0-3,0 мкм |
р. Haloferax |
|
2 |
Колония амебовидной формы с волнистым краем, изогнутый профиль, блестящая, тянущейся консистенции, зернистая, молочного цвета с темно-коричневыми включениями |
251 |
Кокки, 0,8-1 мкм, виде скоплений неправельной формы. |
р.Halococcus |
|
3 |
Колония круглой формы с валиком по краю, края ровные, профель изогнутый, блестящая, слизистой консистенции, молочного цвета, по краю переходящего в коричневый. |
128 |
Г+ бесспоровые палочки, 1,0-1,2*1,0-3,0 мкм. |
р.Halobacterium |
|
4 |
Колонии круглые, выпуклые, блестящие, слизистой консистенции, светло-серого цвета. |
956 |
Г+ споровые палочки, 1,3-2,1*1,5-3,0 мкм |
Bacillus |
|
5 |
Колонии круглые, глянцевые, с не ровными краями, выпуклые, зернистые, желтого цвета |
26 |
Г+ короткие палочки, объединенные в цепь, спорообразующие |
Bacillus |
|
6 |
Колонии неправильной формы, зернистые, глянцевые, желтого цвета |
3 |
Г+ кокки, 1,2-1,6 мкм, объединенные в не длинные цепочки |
Streptococcus |
|
7 |
Колонии неправильной формы, плоские, кожистые, серого цвета |
23 |
Г- необразующие палочки, 1,3-1,6*1,8-2,3 мкм |
Providencia |
|
8 |
Колонии темно-бурого цвета, точечные, глянцевые |
15 |
Г- кокки, 1,3-15*1,6-1,9 мкм |
Pseudomonas |
2) Ср. Чапека используется для выделения грибной микрофлоры.
Посевы со ср.Чапека просматривались в течении 20 суток. В данных посевах было выявлено 4 разновидности грибов, и их общее количество на 1 мл воды составляет 50 КОЕ/мл. При прямой микроскопии данных колоний были выделены 2 рода грибов.
1. Колонии бархатистой консистенции, белого цвета по краю, в конидиальной зоне темно-зеленые. Не выделяют пигмент в агар. Предположительно данный гриб относится к роду Aspergillus.
2. Колонии бархатистой консистенции, белые как по краю, так и в конидиальной зоне, пигмент в агар не выделяют. При микроскопии был определен предположительный род данного гриба- Acrеmonium.
3. Колонии с очень сильно развитым воздушным мицешием, желтого цвета, пигмент в агар не выделяют, при дальнейшем росте приобретают серо-черную окраску. Предположительно данный гриб относится к роду Aspergillus.
4. Колонии бархатистой консистенции, серо-зеленого цвета, пигмента не образуют. Предположительно относится к роду Aspergillus.
5. Колонии бархатистой консистенции, в центре колонии имеют темно-зеленую окраску, по краям колонии окраска ярко-зеленая, предположительно относится к роду Aspergillus.
3) Ср. Сабуро используется для выявления дрожжевой микрофлоры.
Счет колоний дрожжей производился 2 раза: первый раз через 5 суток и второй раз через 10 суток. Все выросшие колонии были прмикроскопированы, дрожжи были отмечены в некоторых из них. На ср. Сабуро были выявлены колонии дрожжей, их содержание в 1 мл = 120 КОЕ/мл, эти колонии имеют круглую форму, гладкие края, выпуклый профиль, блестящие, розового цвета. Производили микроскопию фиксированных мазков данных колоний, окрашенных по Граму. При микроскопии были обнаружены клетки дрожжей овальной и удлиненно- овальной формы, диаметром 6-10 мкм. Помимо дрожжевой микрофлоры было выявлено наличие колоний бактерий, но их содержание не значительно.
4) Голодный агар используется для выявления олиготрофной микрофлоры водоема.
Спустя 7 дней инкубации была определенна общая численность олиготрофов в 1 мл воды оз. Мраморное ОМЧ=3,3*102 КОЕ\мл.
