2.2.1. Определение количества эритроцитов

Подсчет числа эритроцитов производился традиционным методом в камере Горяева. Для этого исследуюмую периферическую кровь (0,02 мл) разводили 0,9% раствором натрия хлорида (4 мл). После осторожного перемешивания каплю разведенной крови помещали в камеру Горяева. Подсчитывали эритроциты в 5 больших квадратах.

Расчет общего количества эритроцитов в 1 мл крови производили по следующей формуле:

Х = А· 4000 · В, где

Б

Х - число эритроцитов в 1 мкл крови;

А - количество форменных элементов в определенном количестве малых квадратов;

Б - количество сосчитаных малых квадратов;

В - степень разведения крови;

1/4000 - объем малого квадрата.

2.2.2. Определение содержания гемоглобина

Концентрацию гемоглобина определяли гемоглобинцианидным методом, принцип которого в том, что при взаимодействии с железосинеродистым калием, гемоглобин окисляется, образуя с ацетонциангидридом окрашенный гемоглобинцианид. Интенсивность окраски последнего пропорциональна количеству гемоглобина.

К 5 мл трансформирующего раствора приливали 0,02 мл крови, при этом разведение крови достигается в 25 раз. Полученный раствор через 10 минут фотоколориметрировали при длине волны 500-600 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 10 мм против холостой пробы.

Расчет производили по следующей формуле:

Hb (г %) = Еоп · С · К · 0,001, (г/л) где

Еот

Еоп - зкстинкция опытной пробы;

Ест - экстинкция стандартного раствора;

С - концентрация гемиглобинцианида в стандартном растворе, мг %;

К - коэффициент разведения крови;

0,001 - коэффициент для подсчета мг / 100 мл в г / 100 мл.

2.2.3 Определение гематокрита

Гематокритная величина дает представление о соотношении между объемом плазмы и объемом форменных элементов в крови. Определение гематокрита производили при помощи микроцентрифуги (МЦГ - 8).

Заполненные капилляры на 7/8 длины кровью центрифугировали в течении 5 минут при скорости 8000 оборотов в минуту. После чего определяли процентное соотношение форменных элементов.

2.2.4. Определение эритроцитарных индексов

а). Средний объем эритроцита (СОЭр). Это отношение общего обьема эритроцитов (Ht) в данном объеме крови к числу эритроцитов в том же объеме, т. е.

СОЭр = Ht , ( мкм3)

количество эритроцитов

б). Среднее содержание гемоглобина в эритроците (СГЭ). это отношение концентрации гемоглобина в 100мл крови к числу эритроцитов в том же объеме крови.

СГЭ = Hb , (пг)

количество эритроцитов

в). Средняя концентрация гемоглобина в эритроците. Это количество гемоглобина в граммах в 100 мл. Эритроцитов (36 г/100 мг - предельная загрузка эритроцита гемоглобином при нормальном объеме клетки).

СКГЭ = Hb . 100, (%)

Ht

2.3. Методы статистической обработки результатов

Полученные данные были обработаны статистически (Лакин, 1980). Применялся параметрический метод вариационной статистики.

1. Нахождение среднего арифметического значения членов совокупности (М) и среднего квадратичного оклонения (m) велось по формуле:

М = å ; s = ± Ö S • a2

n n - 1 ,

где S - сумма вариант;

n - число вариант;

s - среднее квадратичное отклонение.

2. Определение m - средней квадратичной ошибки:

m = ± s

Ö n

3. Определение критерия достоверности (t) велось по Стьюденту:

t = М1 - М2

Ö m12 + m22

III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Количественные показатели красной крови у здоровых детей ненцев

Климат Северного региона характеризуется рядом факторов, отрицательно влияющих на здоровье детей. Большинство физиологов и клиницистов считают, что неблагоприятное воздействие на организм оказывают: длительный период низких температур воздуха, чрезвычайно неустойчивая погода, сильные ветра, резкие перепады атмосферного давления.

Нами проведено исследование показателей периферической красной крови у детей коренных жителей ЯНАО при заболеваниях верхних дыхательных путей (острый бронхит и острый тонзилит). Заболевания дыхательных путей наиболее частая патология у детей Северных широт, т. к. климатогеографические условия Крайнего Севера оказывают влияние на иммунологические показатели (Щеголева и др., 1995), снижая их и увеличивая заболеваемость. Не состовляют исключение и дети коренных национальностей. Хотя исследователями и признается, что суровые климатические условия Крайнего Севера считаются адекватными, соответствующими фенотипическим свойствам организма аборигенов, у детей сохраняется высокий процент заболеваемости, в том числе и органов дыхания.

Морфологический состав периферической крови является одним из показателей реактивности организма, особенно детского (Александрова, 1976; Агаджанян, 1992; Алексеев, 1998).

В качестве контроля использованы гематологические показатели, полученные при обследовании здоровых детей ненцев, постоянно проживающих в поселке Тазовский ЯНАО.

Анализ полученных параметров красной крови обследованных детей (таб. 2) показал, что характеристика клеточного состава периферической крови в основном подчиняется закономерностям, подробно изученным и хорошо известным в литературе (Тур, Шабалов, 1970; Бисярина, Рапопорт, 1978).

У здоровых детей коренных национальностей, проживающих в поселке Тазовский, количество эритроцитов хотя и не выходило за рамки физиологической нормы (таб. 1), но приближалась к его верхней границе. Кроме того выявлено, что у мальчиков в возрасте 8 лет количество эритроцитов выше, чем у шестилетних (5,08 ± 0,14 Кл · 1012л и 4,61 ± 0,11 Кл ·1012л соответственно, р < 0,05), а в группе 10 летних детей этот показатель достоверно ниже, чем у 8 летних (р < 0,05).

Показатель концентрации Hb у обследованных нами здоровых детей находился на верхней границе физиологической нормы, характерной для детей средних широт и не имел достоверных различий в зависимости от возраста и пола.

Полученные нами данные согласуются с исследованиями Г. Н. Дегтевой и М. Х. Шраги (1995), которые показали, что у жителей Северных широт такие показатели периферической крови, как количество эритроцитов и концентрация Hb имеют тенденцию к увеличению. Эти изменения у детей северных популяций, на наш взгляд, являются биологически оправданными, поскольку в условиях пониженного барометрического давления и длительного воздействия низких температур создается особый режим кислородного обеспечения, составным компонентом которого является система красной крови.

По мнению А. П. Авцына и А. Г. Марачева (1974, 1977) увеличение числа эритроцитов вызвыно повышенными энергозатратами в условиях Севера.

Изменение кислородного режима организма приводит к изменению количественных показателей периферического звена системы эритрон.

А. А. Черная (1989), исследуя гематологические показатели у детей коренных жителей в зимний период, отмечала снижение числа эритроцитов и концентрации Hb. Полученные нами данные свидетельствуют об увеличении количественных показателей системы эритрон. Расхождения результатов, по-видимому, связано с тем, что обследования проводились в различные сезоны года.