Класс жгутиковые лейшмании, трихомонады, лямблии, трипаносомы
Рис. № 3. Большая песчанка.
Рис № 4 Жизненный цикл Leishmania donovani
Рис № 5 Жизненный цикл Leishmania tropika
Клиника.
Висцеральным лейшманиозом чаще заболевают дети. После инкубационного периода длительностью от нескольких недель до нескольких месяцев у заболевшего повышается температура тела, в разгаре болезни достигающая 39—40°С, появляется вялость, адинамия, бледность, исчезает аппетит, увеличивается, иногда резко, селезенка и печень, вследствие чего заметно выступает живот (рис.№ 6)
Рис № 6 Ребенок, больной висцеральным лейшманиозом.
Развиваются анемия и истощение больного.
Заболевание тянется несколько месяцев и при отсутствии лечения обычно заканчивается смертью, непосредственной причиной которой часто являются такие осложнения, как пневмония, диспепсия.
При заражении человека возбудителем кожного лейшманиоза после инкубационного периода от 1— 2 нед до нескольких месяцев (при зоонозном типе этот период обычно короткий) в местах укусов москитов появляются небольшие бугорки. Они буровато-красноватого цвета, средней плотности, обычно малоболезненные. Бугорки постепенно увеличиваются и затем изъязвляются — через 3— 6 нед при антропонозной форме и через 1—3 нед при зоонозной. Возникают язвы с отеком окружающей ткани, воспалением и увеличением лимфатических узлов.
Процесс тянется несколько месяцев (при антропонозной форме—больше года), заканчиваясь выздоровлением. На месте язв остаются рубцы. После перенесенного заболевания формируется стойкий иммунитет.
Диагностика.
При постановке клинического диагноза указанные выше основные симптомы заболевания являются опорными. Следует учитывать эпидемиологические данные
(проживание в неблагополучных по лейшманиозу местах и т.д.). Окончательный и достоверный диагноз висцерального лейшманиоза ставится на основании обнаружения возбудителя.
Исследование пунктата костного мозга
С целью обнаружения возбудителя висцерального лейшманиоза, а в ряде случаев и других простейших исследуют костный мозг.
Костный мозг получают, пунктируя гребень подвздошной, головку большеберцовой кости или грудину. Во всех случаях пункция является ответственной процедурой и производится только врачом.
Полученный при пункции костный мозг помещают на предметное стекло и, осторожно размазывая тонким слоем с помощью шлифованного стекла, готовят мазок. При значительной примеси крови в пунктате на стекле находят маленькие белые комочки и готовят из них мазки.
Фиксация мазка. Мазок сушат на воздухе, фиксируют 30 мин в абсолютном этиловом спирте или 5 мин в метаноле (метиловом спирте), снова высушивают на воздухе. Фиксированные мазки можно хранить до окраски несколько дней.
Окраска мазка. Стекла укладывают мазками кверху на стеклянные палочки в фотокювете. На всю поверхность мазка наливают разведенную в фосфатном буфере (рН 6,9—7,1) краску Романовского на 30—50 мин. Продолжительность окраски зависит от температуры помещения — в теплом она меньше, в холодном — больше. После окраски препарат ополаскивают дистиллированной водой (или кипяченой) и высушивают. Исследуют под иммерсией.
Оценка результатов. В разгаре болезни лейшмании могут обнаруживаться легко. В ранней стадии и в период лечения требуется более длительный просмотр мазка — не менее 40 мин.
В препаратах лейшманий могут находиться группами или поодиночке, как внутриклеточно, так и вне клеток в связи с разрушением их во время приготовления мазка.
При кожном лейшманиозе исследуют мазки из не распавшихся бугорков или из инфильтратов вблизи язв.
Пункция кожных поражений и лимфатических узлов.
При некоторых болезнях протозойной этиологии, например, кожном лейшманиозе, исследуют материал из кожных поражений, а в ряде случаев исследуют пунктат лимфатических узлов (лейшманиоз, трипаносомоз, токсоплазмоз).
При кожном лейшманиозе мазки готовят из не распавшихся бугорков и язв. Кожу в области бугорка протирают спиртом, двумя пальцами слегка сдавливают и иглой или кончиком скальпеля делают прокол или поверхностный надрез. Из выступившей серозно-кровянистой жидкости готовят на предметном стекле мазок.
При наличии язв материал брать непосредственно из них не рекомендуется, так как наличие микрофлоры и остатков разрушенных клеток затрудняет поиски лейшманий. Поэтому после предварительной обработки кожи спиртом область вокруг язвы сжимают двумя пальцами и в зоне инфильтрата по краю язвы делают прокол иглой или поверхностный разрез скальпелем. Для приготовления мазков используют каплю серозно-кровянистой жидкости или полученный при поскабливании скальпелем по краю разреза материал.
Мазки сушат на воздухе, фиксируют смесью Никифорова и красят по Романовскому.
Оценка результатов. В препарате должны быть хорошо различимы клетки инфильтрата — макрофаги, эндотелиальные, плазматические, лимфоидные клетки, фибробласты и небольшая примесь клеток периферической крови. Наличие в препарате эпителиальных клеток, бесструктурных глыбок, окрашивающихся в равномерно сиреневый цвет, означает, что соскоб был взят поверхностно и должен быть повторен. В мазке не должно быть слишком много крови, а также гноя и бактерий.
Лейшмании обнаруживаются в макрофагах, а также вне клеток в виде округлых, овальных или удлиненных телец размером 3—5 мкм.
Лейшмании легко обнаруживаются на начальных стадиях изъязвления. В гнойном отделяемом язвы могут быть обнаружены лишь деформированные и разрушающиеся лейшмании, по которым трудно поставить диагноз. На стадии заживления обнаруживаются редко.
Пункция увеличенных лимфатических узлов обычно проводится врачом с помощью инъекционной иглы после соответствующей обработки кожи. Узел придерживают рукой, содержимое через иглу насасывают шприцем и наносят на предметное стекло.
В ряде случаев применяют метод посева крови больного или материала из кожных поражений или костного мозга на среду, которая готовится из агара с добавлением дефибринированной крови кролика. В положительном случае на 2— 10-й день в культуре появляются жгутиковые формы лейшманий.
Профилактика.
Профилактические мероприятия выбираются применительно к виду лейшманиоза. При лейшманиозе проводят подворные обходы для раннего выявления больных, организуют систематическое уничтожение безнадзорных собак и осмотры зарегистрированных собак ценных пород (охотничьи, сторожевые, служебные и т.д.). При антропонозной форме кожного лейшманиоза основным профилактическим мероприятием является выявление и лечение больных людей. При зоонозной форме организуют истребление диких грызунов.