Определение острой токсичности экстракта молочая Полласа
6 этап – депарафинирование с помощью ксилола. Чтобы в последующем удалить ксилол, стекло со срезом ставят на пять минут в 96% спирт.
7 этап –окраска гематоксилином С помощью гематоксилина окрашиваются ядра клеток.
8 этап - дифференцировка в соляно-кислом спирте.
9 этап - окрашивание в эозине – для выявления цитоплазмы.
10 этап – обезвоживание в спирте двухкратно (используется два спирта одинакового процента).
11 этап - просветления срезов карбол-ксилолом и ксилолом.
Срезы заливаются бальзамом и покрываются покровным стеклом.
3.Экспериментальная часть.
Определение острой токсичности у мышей.
Экстракт №1
(спиртовой с трехкратной очисткой ацетоном).
Опыт №1(16.12.2003).
Экстракт в дозе 3300 мг/кг, ввели внутрибрюшинно 1-ой мыши. В данном опыте мышь выжила.
Реакция на введение экстракта.
| Через 3 мин | Мочеиспускание |
|
через 10 мин | ЧСС=160 ударов в мин |
|
Через 15 мин | Миоклонус задних лапок и «умывание» |
|
Через 20 мин |
Дыхание по типу Чейн-Стокса, Диафрагмальные судороги |
Поведение.
|
0-15 мин |
Беспокойство, повышенная двигательная активность |
|
15-40 мин |
Заторможенность, сидит в одном положении, при судорогах единичные шаги вперед, дефекация, симптомы «корчи» (местнораздражающее действие) |
|
Через 60 мин | Усиленное «умывание» |
Опыт№2 (17.12.2003)
Ввели внутрибрюшинно 6-ти мышам экстракт в дозе 7000 мг/кг. Через 2 суток погибло 4 мыши, а через 4 – еще одна.
Реакция на введение экстракта.
|
Через 3 мин |
Мочеиспускание |
|
Через 10 мин |
Дефекация |
|
Через 15 мин |
симптомы «корчи» |
|
Через 20 мин |
ЧДД=172 в мин, заваливание на бок |
|
Через 26 мин |
Единичные судороги |
|
Через 50 мин |
Лежачее положение ЧСС=48 ударов в мин, генерализованные судороги (подпрыгивание) |
|
Через 52 мин |
Судороги |
|
Через 55 мин |
Смерть |
Определение массы органов.
|
№п/п |
Масса тела, мг |
Масса сердца, мг |
Масса печени, мг |
Масса легких, мг |
Масса почек, мг |
Масса селезенки, мг | ||
|
1 |
2800 |
188 |
1237 |
384 |
396 |
119 | ||
|
2 |
2600 |
157 |
1544 |
232 |
369 |
274 | ||
|
3 |
2400 |
140 |
1157 |
198 |
421 |
250 | ||
|
4 |
2400 |
141 |
1229 |
332 |
425 |
258 | ||
|
M ± m |
2550± 96,8 |
146±5,8 |
1291,7± 27,3 |
286,5± 51,8 |
402,7± 13,5 |
225,25± 8,2 | ||
Опыт №3 (17.12.2003).
Ввели внутрибрюшинно 6-ти мышам экстракт в дозе 3500 мг/кг. Через 2 суток погибло 4 мыши, выжило 2.
Определение массы органов.
|
№п/п |
Масса тела, мг |
Масса сердца, мг |
Масса печени, мг |
Масса легких, мг |
Масса почек, мг |
Масса селезенки, мг |
|
1 |
2800 |
204 |
1345 |
380 |
460 |
284 |
Опыт №4 (19.12.2003).
Ввели внутрибрюшинно 6-ти мышам экстракт в дозе 1750 мг/кг. Через 2 суток погибло 2 мыши, выжило 4.
Определение массы органов.
|
№п/п |
Масса тела, мг |
Масса сердца, мг |
Масса печени, мг |
Масса легких, мг |
Масса почек, мг |
Масса селезенки, мг | |||||
|
1 |
2400 |
158 |
853 |
231 |
276 |
110 | |||||
|
2 |
2000 |
117 |
1139 |
225 |
248 |
126 | |||||
|
M ± m |
2200± 250 |
137,5± 25,6 |
996± 178,7 |
228±3,7 |
262± 17,6 |
118±10,0 | |||||
